меню

Анализ эффективности Фелиферона при наиболее распространенных ретровирозах кошек

Сокращения: БАК – биохимический анализ крови; ВИК – вирус иммунодефицита кошек; ВЛК – вирус лейкемии кошек; ДНК – дезоксирибонуклеиновая кислота; ИФН – интерферон; МЕ – международные единицы; ОАК – общий анализ крови; ПЦР – полимеразно-цепная реакция; РНК – рибонуклеиновая кислота.

В 2017 году исполнилось 60 лет с момента открытия и начала изучения интерферонов. Интерфероны (ИФН) сегодня рассматриваются как наиболее изученные медиаторы иммунного ответа, обладающие широким спектром биологической активности (более 300 эффектов) и пригодные для профилактики и терапии вирусных инфекций и ряда невирусных заболеваний.

Из широкого спектра свойств в медицине и ветеринарии наибольший интерес представляет противовирусное, антипролиферативное и иммуностимулирующее действие [1].

В ветеринарии важно применение интерферонов, обладающих видовой специфичностью. Интерфероны разных биологических видов имеют различающуюся химическую структуру и наряду со свойствами межвидовой гомологии обладают видовой специфичностью, которая выражается в разной степени фармако-биологической активности интерферонов у разных видов животных.

При использовании ИФН человека кошками отмечалась сниженная эффективность, наработка нейтрализующих антител, в некоторых случаях побочные эффекты [8, 9]. При этом о применении кошачьего ИФН имеется множество публикаций, свидетельствующих о его эффективности [3, 5, 9].

В 2015 году в Российской Федерации выпущен первый препарат для ветеринарии на основе видоспецифичного, кошачьего, интерферона – Фелиферон. Производитель Фелиферона – Научно-технологический центр «БиоИнвест». Разработка Фелиферона принадлежит коллективу высококвалифицированных специалистов (ученых) в области молекулярной биологии и биотехнологии. Компания располагает современной специализированной научно-технологической базой, предоставляющей широкий спектр возможностей для практического воплощения научных идей. Оснащение компании обеспечивает качественное проведение полного комплекса научно-исследовательских работ от идеи и дизайна генетических конструкций до оптимизации масштабирования биотехнологической технологии; организации и проведения необходимых доклинических и клинических испытаний.

За три года практики активного применения Фелиферон занял лидирующие позиции на рынке ветеринарных иммуномодуляторов. На данный момент уже более 60% ветеринарных клиник РФ успешно применяют препарат при лечении инфекционных заболеваний кошек.

Практически сразу после начала выпуска в адрес производителя стали поступать обращения от ветеринарных врачей различных регионов о возможностях применения Фелиферона в терапии ретровирусных инфекций кошек, что послужило поводом инициировать проведение исследований эффективности Фелиферона при ВИК и ВЛК.

Действительно, ретровирозы кошек за предыдущие несколько лет приобрели высокую актуальность. По данным эпизоотической статистики в Москве и МО на 2015 год процент кошек с положительными тестами на ВЛК составил 20,7% [2]. При этом отмечается общее снижение количества случаев ВИК.

Количество смертельных исходов кошек с ВЛК при скученном содержании достигает 80% в первые три года после заражения [3,4]. При этом, продолжительность жизни кошек увеличивается и напрямую зависит от сохранения благоприятной обстановки внешней среды [8].

Существенные изменения произошли в методологии диагностики ретровирусных инфекций кошек. До недавнего времени для понимания интенсивности размножения ретровирусов в крови кошек использовался показатель провирусной ДНК. Обнаружение провирусной ДНК в крови в течение длительного времени позволяет судить о прогрессировании инфекции [3…5].

В 2017 г. в России стало возможным определение вирусной РНК в периферической крови кошек, как более объективного показателя течения ретровирусной инфекции в организме кошки [6].

В 2016-2017 гг. проведены исследования эффективности Фелиферона при ретровирусных инфекциях кошек. В контрольные и опытные группы по 10 голов отбирались животные, у которых по данным обследования и диагностики обнаружена одна из инфекций: или ВИК или ВЛК. Фелиферон применялся в монотерапии по схеме 400 000 МЕ (1,0 мл) в течение 7 дней, далее три инъекции в той же дозе через день. На 14 день производилось контрольное взятие крови и лабораторная диагностика (ОАК, БАК, ПЦР) с целью определения изменения лабораторных показателей.

На всем протяжении применения Фелиферона велось наблюдение за состоянием кошек. Все данные, включая массу и возраст животных, подвергались обработке с применением непараметрических методов статистики. На момент начала исследования популяция животных однородна. Анамнестические данные животных сходны: у животных отмечались длительные, вялотекущие риниты, конъюнктивиты, энтероколиты, у некоторых – стоматиты.

Фармакологические эффекты Фелиферона при ВИК и ВЛК различаются между собой. При ВИК отмечена статистически значимая нормализация показателей ОАК после применения Фелиферона (табл. 1).

Таблица 1. Результаты сравнения показателей ОАК у рандомизированных животных на 14 день между экспериментальными группами

Показатели Физиол. Нормы Наименование групп n День 0 День 14
Лейкоциты, 103 5,5-18,5 Фелиферон 10 9,85±3,15 16,15±3,94*
Контроль 10 5,50±4,79 4,00±4,81
СЯ нейтрофилы, % 35-75 Фелиферон 10 35-75 69,00±12,52*
Контроль 10 74,50±7,18 74,00±9,87
Моноциты, % 1-4 Фелиферон 10 0,00 4,00±0,35*
Контроль 10 0,00 0,00
Лимфоциты, % 20-55 Фелиферон 10 20-55 25,00±2,25*
Контроль 10 16,00±5,42 14,00±1,67

При ВЛК результаты ОАК после окончания курса Фелиферона показывали улучшения примерно у половины животных группы. Однако по результатам статистической обработки общая картина не претерпела статистически значимых изменений.

При наблюдении за животными на предмет отдаленных последствий применения Фелиферона были обнаружены достоверные различия показателей гемоглобина и тромбоцитов на 180 день. В группе с применением Фелиферона данные показатели лучше, чем в контроле, там, где Фелиферон не применялся (табл. 2, 3).

Таблица 2. Динамика содержания гемоглобина у рандомизированных животных в опытной и контрольной группах

Группа Норма лаборатории День эксперимента
0 14-ый 45-ый 180-ый
Фелиферон 80…150 142±24,2 100±28,3 106±31,4 106,5±14,7*
Контроль 127±24,6 81±29,6 94±15,4 86±26,4

Примечание: * – статистически значимое различие между группой Фелиферона и контрольной группой р≤0,05.

Таблица 3. Динамика количества тромбоцитов у рандомизированных животных в опытной и контрольной группах

Группа Норма лаборатории День эксперимента
0 14-ый 45-ый 180-ый
Фелиферон 300…630 265,0±122,7 232,5±206,5 229,0±199,7 196,0±44,0*
Контроль 190,0±98,1 209,3±80,7 209,0±164,0 108,0±65,1

Примечание: * – статистически значимое различие между группой Фелиферона и контрольной группой р≤0,05.

В настоящее время нами продолжаются клинические исследования Фелиферона при ВЛК. В качестве основного критерия эффективности используется определение количества вирусной РНК в крови. Данный параметр позволяет объективно оценить клиническую ситуацию, касательно основного заболевания, а также эффективность проводимого лечения Фелифероном.

В таблице 4 приведены результаты изменения вирусной нагрузки у кошек, находящихся на лечении Фелифероном по поводу ВЛК.

Таблица 4. Динамика вирусной нагрузки при применении Фелиферона при вирусной лейкемии кошек*

Показатели Вирусная нагрузка
Единицы измерения Копий/мл
Группа До После
1 21 000 000 350 000
2 87 000 Менее 500
3 36 000 000 570 000
4 340 000 Менее 500
5 5 400 000 71 000

Примечание: * – незавершенное клиническое исследование ИВЦ МВА им К.И. Скрябина по оценке влияния Фелиферона на показатели виремии в периферической крови кошек

На основании данных снижения количества вируса в периферической крови, функцию Фелиферона при терапии ретровирозов кошек можно определить как противовирусную.

Цель лечения Фелифероном ВИК, ВЛК – это облегчение симптомов заболевания и повышение уровня функционирования организма кошки в целом. Полное выздоровление от ретровирусных инфекций пока является не разрешенной проблемой ветеринарной и медицинской науки.

С установлением противовирусной эффективности Фелиферона в отношении ВИК, ВЛК тактика ведения пациентов с данными заболеваниями позволяет включать в себя этиотропную терапию посредством Фелиферона.

Перед началом лечения для определения потребности данного животного в методах и средствах терапии необходима вирусологическая диагностика с применением ПЦР. В случае недоступности определения вирусной РНК в качестве ориентира может послужить наличие или отсутствие провирусной ДНК в крови кошки.

При отсутствии возможности ПЦР-диагностики в составе обследования и диагностических мероприятий ориентиром при выборе тактики лечения должен служить ОАК, который необходим для исходного и контрольных обследований с целью мониторинга общего состояния животного.

При результатах ПЦР и ОАК, удовлетворяющих показаниям к применению противовирусной терапии возможно назначение Фелиферона: первичного курса или повторных курсов.

В заключении следует отметить, в первую очередь, разность выявленных эффектов Фелиферона по отношению к каждому из возбудителей (ВИК и ВЛК) в отдельности.

При ВИК всегда наблюдается повышение показателей лимфоцитов и лейкоцитов после окончания курса Фелиферона.

При ВЛК после окончания курса Фелиферона показатели ОАК как правило, нормализуются, однако достоверность данных изменений на данный момент не выявлена. Выявлен эффект замедления прогрессирования заболевания по показателям гемоглобина и тромбоцитов в периферической крови кошек.

Снижение вирусной нагрузки, вплоть до неопределяемого уровня, отмечается во всех случаях применения Фелиферона при ВИК или ВЛК.

Отслеживание лечебного эффекта Фелиферона должно включать (но не ограничиваться) исследования ОАК и, при возможности, ПЦР для понимания динамики виремии. Лечение ретровирусных инфекций кошек должно иметь комплексный характер и быть адаптировано индивидуально под каждое больное животное.

Оценка эффективности применения Фелиферона
при лечении кошек, больных ретровирусными инфекциями

Литература

1. Ф. И. Ершов. Открытие биологического феномена и его последующее научное познание. ФГБУ НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Н. Ф. Гамалеи Минздравсоцразвития России, Москва, – 2012.

2. Бажибина Е.Б. Мониторинг результатов лабораторных исследований кошек – носителей хронических вирусных инфекций / Е.Б. Бажибина, В.А. Бажибина // Российский ветеринарный журнал. – 2016. – № 3. – С. 6-8

3. Cotter, S.M. Feline viral neoplasia. In Infectious diseases of the dog and cat, 2nd ed.; Greene, C.E. Ed. WB Saunders: Philadelphia, 1998.

4. Levy, J.K. FeLV and non-neoplastic FeLV-related disease. In Textbook of veterinary internal medicine, Ettinger, S.J.; Feldman, E.C. Eds. WB Saunders: Philadelphia, 2000.

5. Cattori V, Pepin AC at al. Real-time PCR investigation of feline leukemia virus proviral and viral RNA loads in leukocyte subsets. Vet. Immunol Immunophatol. 2008 May 15; 123 (1-2):124-8. doi: 10.1016/j.vetimm.2008.01.018. Epub 2008 Jan 19.

6. Nesina S, Katrin Helfer-Hungerbuehler A. Retroviral DNA-the silent winner: blood transfusion containing latent feline leukemia provirus causes infection and disease in naive recipient cats.

7. Пархоменко, С.А. / С.А. Пархоменко, О.А. Зейналов / Применение Фелиферона® в качестве средства этиотропной терапии при вирусной лейкемии кошек // Российский ветеринарный журнал. – 2017. – № 5. – С.

8. Levy J.K., Scott H.M., Lachtara J.L., Crawford P.C. Seroprevalence of feline leukemia virus and feline immunodeficiency virus infection among cats in north America and risk factors for seropositivity. J AmVetMedAssoc. 2006; 228: 371–376.

9. Zeidner, Nordin S. Mathiason-dubard et al. Alpha Interferon (2b) in Combination with Zidovudine for the Treatment of Presymptomatic Feline Leukemia Virus-Induced Immunodeficiency Syndrome / Nordin S. Zeidner, Matthew H. Myles, Candace K. // Antimicrobial agents and chemotherapy, 1990. – No. Sept. – pp. 174–176.

Оценка эффективности применения Фелиферона при лечении кошек, больных ретровирусными инфекциями